Sommaire

Dosages colorimétriques

• Dosage des sucres totaux: Il est basé sur la condensation des dérivés chromogènes de furfural formés par l'action d'acide concentré sur les glucides avec diverses substances susceptibles de donner naissance à des chromophores. Les méthodes les plus utilisées sont celles préconisées - par DUBOIS et al (au phénol) - par TILLMANS et PHILLIPI (à l'orcinol) - ou par DREYWOOD (à l'anthrone) ].

• Dosage des acides uroniques [2, 8, 14] Le principe du dosage des acides uroniques est semblable à celui des sucres totaux. Deux méthodes sont couramment utilisées : - la méthode de DISCHE utilisant le carbazole, ou le dibenzopyrrole ; - la méthode de BLUMENKRANTZ et G.A-HANSEN utilisant le métahydroxydiphényle.

Dosage manométrique [14, 34, 53]

Les polyuronides traités par un acide minéral fort ou par le chlorure de zinc à chaud subissent une décarboxylation. Ainsi, les CO2 sont précipités sous forme de BaCO3 par l'hydroxyde de barium Ba(OH)2. L'excès de Ba(OH)2 est alors dosé en retour.

Hydrolyse partielle et totale

Méthylation - Acétylation - Dépolymérisation partielle en milieu non aqueux

Fractionnement

1. CP: sur papier Wattman n°3 - Système de solvants: Py/ AcOEt / AcOH /H2O ( 5 - 5 - 1 - 3 )- Révélation: réactif à l'oxalate d'aniline

2. CCM: Silicagel 60 - Système de solvants: Isopropanol / AcOEt / H2O ( 6 - 3 - 1 ) - Révélation: naphtoréesorcinol à 0,2% dans EtOH

3. Chromatograohies sur Colonnes - Echangeurs d'ions (forme bisulfite) type Dowex . Elution par EtOH à diverses concentrations ou CC sur résines acide

4. HPLC: Chromatographie Liquide Haute Performance: pour l'isolement de ManUA ou GulUA. D'où on déduit le rapport M/G

Spectrophotométrie IR [1, 32, 77 ] : caractérisitique des alginates:

• un pic très intense entre 1550 et 1610 cm-1 ( vibration d'allongement asymétrique de C=O de - COO- [ 25, 28, 32, 77]
• et un pic intense entre 1400 et 1549 cm-1 ( vibratioon d'allongement symétrique de C=O de -COO- [ 25, 28, 32, 77]