1. Réactifs : . Solution aqueuse de phénol 5% (m/v) . H2SO4 concentré - Gamme étalon : solutions de monosaccharides (ManUA)200, 150, 100, 50µg/ml. - Solution de référence : eau distillée (ED) - Solutions à doser 200, 250 µg/ml

2. Mode opératoire: Dans chaque tube à essai, introduire : . 200µl d'ED, ou de solution étalon ou de solution à doser (à l'aide d'une micropipette) . 200µl de la solution phénolique 5% . 1ml de H2SO4 concentré (à additionner brutalement) . Homogénéiser le mélange en le portant au bain-marie à 100°C pendant 5mn . Refroidir 30 mn à l'obscurité.

3. Mesure des DO: lire les densités optiques à la longueur d'onde = 480 nm

4. Résultats:

1. Réactifs : . Solution à 1,5g d' orcinol dans 100ml de H2SO4 aqueuse 30% (v/v) (à conserver à +4°C) . H2SO4 aqueux à 60 % (v/v) - Gamme étalon : solutions de monosaccharide 200, 150, 100, 50 µg/ml - Solution de référence : ED - Solution à doser 200, 250µg/ml

2. Mode opératoire: Dans chaque tube à essai, introduire : 200µl d'ED, ou de solution étalon ou de solution à doser . 400µl de la solution d'orcinol . 3ml de H2SO4 60%. Homogénéisation lemélange . Porter au bain-marie à 80°C, 20mn, puis laisser refoidir à l'obscurité.

3. Mesure des DO: lire les DO e aux longueurs d'onde =510nm (si on soupçonne une potéine) et à 420nm (si on n'a que des polysaccahrides ie au maximum 5 à 10 % de protéine.

1. Réactifs : . Solution à 0,1g de carbazol dans 100ml de EtOH absolu - H2SO4 conc.-

2. Réaction: 1ml ED - Gamme étalon AU - Oses neutres - 1ml de la solution à doser contenant 50 à 100µg UA + 6ml H2SO4 conc. ( doucement le long de la paroi dans de la glace). Agiter. Chauffer au bain-marie à 100°C pendant 20min. Refroidir. Ajouter 0,2ml de la solution de carbazol . Laisser 2h à l'obscurité

3. Lecture à 530nm.

4. Résultats: faire une correction pour les erreurs dues aux oses neutres

• Oses neutres: A = ax + by
• UA : B = cx +

x: quantité réelle d'oses neutres - y: quantité réelle d'AU

A, a, b : absorbance à l'orcinol de 1ml contenant 1µg d'ose neutre , 1µg d'UA

B, c, d: absorbance au carbazol de 1ml contenant 1µg d'ose et 1µg d'AU

1. Réactifs : . Solution à 0,15g de MHDP dans 100ml d'une solution aqueuse de soude à 0,5g pour 100ml - Solution 0,0125M de tetraborate de sodium (10H2O) dans H2SO4 concentré

2. Réaction: 0,2ml solution contenant 0,5 à 20µg AU - Ajouter 1,2ml de tetraborate Mettre les tubes dans la glace - Agiter. Chauffer au bain-marie à 100°C pendant 5min. Refroidir. Ajouter 20 µl de MHDP. Agiter

3. Lecture à 520 nm.

4. Résultats: il n'y a pas d'interférence avec les oses neutres