Méthode au phénol sulfurique [42]

1. Réactifs : . Solution aqueuse de phénol 5% (m/v) . H2SO4 concentré - Gamme étalon : solutions de monosaccharides (ManUA)200, 150, 100, 50µg/ml. - Solution de référence : eau distillée (ED) - Solutions à doser 200, 250 µg/ml

2. Mode opératoire: Dans chaque tube à essai, introduire : . 200µl d'ED, ou de solution étalon ou de solution à doser (à l'aide d'une micropipette) . 200µl de la solution phénolique 5% . 1ml de H2SO4 concentré (à additionner brutalement) . Homogénéiser le mélange en le portant au bain-marie à 100°C pendant 5mn . Refroidir 30 mn à l'obscurité.

3. Mesure des DO: lire les densités optiques à la longueur d'onde = 480 nm

4. Résultats:

Oses Indice
Gal 100%
Glc 128%
Xyl 193%
Ribose 200%
GulAU 50%
Méthode à l'orcinol sulfurique [40]

1. Réactifs : . Solution à 1,5g d' orcinol dans 100ml de H2SO4 aqueuse 30% (v/v) (à conserver à +4°C) . H2SO4 aqueux à 60 % (v/v) - Gamme étalon : solutions de monosaccharide 200, 150, 100, 50 µg/ml - Solution de référence : ED - Solution à doser 200, 250µg/ml

2. Mode opératoire: Dans chaque tube à essai, introduire : 200µl d'ED, ou de solution étalon ou de solution à doser . 400µl de la solution d'orcinol . 3ml de H2SO4 60%. Homogénéisation lemélange . Porter au bain-marie à 80°C, 20mn, puis laisser refoidir à l'obscurité.

3. Mesure des DO: lire les DO e aux longueurs d'onde =510nm (si on soupçonne une potéine) et à 420nm (si on n'a que des polysaccahrides ie au maximum 5 à 10 % de protéine.

4. Résultats:
Oses Indice
Gal 100%
Man 80%
Glc 83%
Xyl 30%
Fructose 43%
GulUA 44%