|
1. Réactifs : . Solution aqueuse de phénol 5% (m/v)
. H2SO4 concentré - Gamme étalon : solutions de monosaccharides (ManUA)200,
150, 100, 50µg/ml. - Solution de référence : eau distillée (ED) - Solutions
à doser 200, 250 µg/ml
2. Mode opératoire: Dans chaque tube à essai, introduire
: . 200µl d'ED, ou de solution étalon ou de solution à doser (à l'aide
d'une micropipette) . 200µl de la solution phénolique 5% . 1ml de H2SO4
concentré (à additionner brutalement) . Homogénéiser le mélange
en le portant au bain-marie à 100°C pendant 5mn . Refroidir 30 mn à l'obscurité.
3. Mesure des DO: lire les densités optiques
à la longueur d'onde
= 480 nm
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1. Réactifs : . Solution à 1,5g d' orcinol dans
100ml de H2SO4 aqueuse 30% (v/v) (à conserver à +4°C) . H2SO4 aqueux à
60 % (v/v) - Gamme étalon : solutions de monosaccharide 200, 150, 100,
50 µg/ml - Solution de référence : ED - Solution à doser 200, 250µg/ml
2. Mode opératoire: Dans chaque tube à essai, introduire
: 200µl d'ED, ou de solution étalon ou de solution à doser . 400µl de
la solution d'orcinol . 3ml de H2SO4 60%. Homogénéisation lemélange .
Porter au bain-marie à 80°C, 20mn, puis laisser refoidir à l'obscurité.
3. Mesure des DO: lire les DO e aux longueurs d'onde
=510nm (si on soupçonne
une potéine) et à 420nm (si on n'a que des polysaccahrides
ie au maximum 5 à 10 % de protéine.
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|