Sommaire

• Lavage :Avant toute opération éliminer toutes les impuretés possibles, telles que sels, sables, coquilles, etc. qui souillent les échantillons d'algues: lavage à l'eau, puis séchage à l'étuve.
• Broyage : fin broyage afin d'optimiser le contact entre les prises d'essai et les solvants lors des diverses opérations ultérieures.
• Dépigmentation:Traiter les poudres d'algues à l'acétone, à l'alcool bouillant, puis à l'éther, pour solubiliser les graisses et afin d'en extraire une partie importante des pigments.

Les carraghénanes sont des composés très solubles dans l'eau [48]. Cette propriété est mise à profit pour leur extraction.

Extraction à chaud ou "Hot Extract" : chauffer la poudre dans l'eau à 90°C, à un pH légèrement alcalin (8-9) [48] (ex: solution 0,5M de NaHCO3). C'est le pH où les carraghénanes sont supposés stables. A un tel pH, il est possible d'augmenter le rendement en carraghénanes en désagrégeant les liaisons entre les dits carraghénanes et les protéines. Un pH trop acide ou trop basique peut détruire les molécules de carraghénanes, par hydrolyse du polymère ou par élimination du groupement sulfate en C6 et formation d'un pont anhydro [16, 35, 48]. Filtrer

La purification est basée sur la capacité des carrghénanes à former un précipité :

- soit en présence d'un excès d'alcool: EtOH précipitent les polysaccharides soous forme de polymères. On élimine ainsi les petites molécules

- soit de façon plus sélective, par addition d'ions métalliques:

• ex1: addition d'un sel d'ammonium quaternaire [16, 48]:(ex.: cetyltriméthylammoniumbromide ou CTAB, nom commercial "cetavlon").Une solution saturée d'acétate de soium dans l'éthanol décomplexe le polysaccharide du cétavlon et permet de récupérer le carraghénate de sodium. Laver à l'éthanol 95%, puis à l'éther. Evaporer puis procéder à une dialyse. Liophyliser
• ex2: addition d'une solution diluée de KCl . Les ions K+ précipitent les kappa-carraghénanes, tandis que les lambda-carraghénanes restent en solution